Avaliação do efeito do uso de conservante e dos diferentes momentos de coleta para a determinação de iodo na urina / The effect of the use of preservative and of the different samples collection times on the iodine determination in urine

A determinação do iodo urinário é o marcador bioquímico mais utilizado para avaliação de suas concentrações, auxiliando em estudos epidemiológicos e na clínica médica. Neste trabalho, foi avaliado o efeito do uso de conservante na coleta de urina em frasco coletor, nos períodos antes (A) e após (B) o almoço, e nas amostras distribuídas em tubos com (C) e sem (S) conservante para determinar as concentrações de iodo e creatinina. A dosagem de creatinina foi utilizada para aferir a função renal. Foram analisadas amostras de 20 indivíduos entre 18 a 40 anos de ambos os sexos. Houve concordância nas concentrações de iodo no (A), sendo o coeficiente de correlação intraclasse (CCI) = 0,769 nos tubos (C) e CCI = 0,724 nos tubos (S), assim como entre (A) CCI = 0,941 e (B) CCI = 0,983. Não houve concordância nas concentrações de creatinina nos tubos (C) CCI = 0,369 e (S) CCI = 0,264 nos dois períodos e, também, entre (A) (CCI =0,916) e (B) (CCI = 0,998). Por não terem sido detectadas variações nas concentrações de iodo nas amostras de urina, ambos os tubos, (C) ou (S), podem ser utilizados com igual confiabilidade. Não foi detecta da variabilidade na determinação de iodo na amostras de urina coletadas nos períodos (A) e (B).

Análise de indicadores internos e externos relevantes à resolutividade diagnóstica em laboratório de referência em imuno-histoquímica / Analysis of internal and external factors potentially relevant to the diagnosis in immunohistochemistry in a public reference laboratory

OBJETIVO: Avaliar a resolutividade da imuno-histoquímica (IHQ) no diagnóstico de neoplasias em um laboratório de referência da rede de saúde pública e determinar potenciais influências da comunicação entre a fonte requisitante e o laboratório executante sobre tal resolutividade. MATERIAL E MÉTODOS: Mil casos oncológicos oriundos de oito hospitais públicos foram submetidos a exame IHQ, sendo 500 imediatamente anteriores e 500 posteriores à intervenção para aprimoramento da comunicação entre os requisitantes e o laboratório de IHQ. A recuperação de antígenos foi realizada pelo calor úmido sob pressão, e o sistema de detecção foi o LSAB plus System. Os resultados foram expressos como positivo, negativo ou inconclusivo. Foram coletadas informações sobre recebimento do bloco de parafina e fixador utilizado, guia de requisição de serviços de diagnóstico e terapia (SADT), laudo anatomopatológico original, topografia, idade e sexo do paciente. RESULTADOS E CONCLUSÃO: Foram coradas 5.719 lâminas pela IHQ de 989 casos considerados. A IHQ mostrou-se resolutiva em 919/989 (92,9 por cento) casos. O número de antígenos por caso variou de um a 22, com média de 5,8 marcadores. A pesquisa de até cinco antígenos resolveu 534 casos e foram necessários até 10 marcadores para esclarecer 919 casos. Ainda hoje, informações básicas, como laudo anatomopatológico, idade e sexo do paciente, topografia, hipótese diagnóstica precisamente exposta, fixador e blocos de parafina em boas condições nem sempre são disponibilizadas aos laboratórios de referência. O aprimoramento dessa comunicação é essencial para a racionalização do fluxo dos exames IHQ e o incremento na qualidade da conclusão diagnóstica.

OBJECTIVES: The aim of this study was to evaluate the resolutivity of immunohistochemical (IHC) assays on neoplastic samples in a public health laboratory and to assess the influence of communication between the requiring institution and reference one on the quality of the IHC diagnosis. MATERIAL AND METHODS: One thousand oncological samples from eight public hospitals were submitted to IHC assay: 500 immediately before and 500 after an intervention demanding further information from the requiring pathologist. Antigen retrieval was performed in a pressure cooker and the detection system was LSAB plus System. The results were expressed as positive, negative or inconclusive. Information about paraffin blocks, fixatives, official requiring form, the attachment of original anatomopathological report, topography of the lesion, age and gender of the patients was collected. RESULTS AND CONCLUSION: From 989 samples, 5,719 slides were stained by IHC, leading to a resolutivity for 919/989 (92.9 percent). The number of antigen tested ranged from one to 22 - average of 5.8 for case. Panels with up to five antigens per case resolved 534 samples, whereas up to 10 markers were necessary to resolve 919 samples. Even nowadays, basic information, such as anatomopathological reports, age, gender, representative and technically superior paraffin block are not always available to the reference laboratory. The improvement of such communication is essential to rationalize the flux of immunohistochemical tests and to enhance the quality of diagnostic conclusions.

Controle de qualidade interlaboratorial em imuno-histoquímica: citoceratinas e receptor de estrógeno como modelos / Interlaboratorial quality-control in immunohistochemistry: cytokeratins and estrogen receptors as models

INTRODUÇAO: O grande incremento do uso da imuno-histoquímica (IHQ) em numerosos laboratórios de anatomia patológica amplia o poder de resolução diagnóstica, mas traz certo grau de heterogeneidade de procedimentos e resultados. Seguindo recentes propostas da literatura internacional, participantes do Clube de IHQ da Sociedade Brasileira de Patologia desenvolvem ações de controle de qualidade, aplicando protocolos de sua rotina à pesquisa de antígenos que sirvam como indicadores de qualidade da reação. MATERIAL E MÉTODO: Um total de dez laboratórios participou das duas etapas deste estudo, cujos marcadores foram pancitoceratinas e receptores de estrógeno. Com lâminas controle recebidas dos laboratórios, cada participante efetuou a técnica de IHQ conforme sua prática diária, retornando as lâminas juntamente com o formulário de procedimento. A avaliação semiquantificada de 0 a 4 da intensidade da reação específica e de 0 a 3 da coloração de fundo e da qualidade da técnica histológica foram atribuídas individual e sigilosamente durante a projeção em data show em reunião do Clube de IHQ, gerando um escore final. RESULTADOS E DISCUSSAO: As variações na imunocoloração de citoceratinas e receptor de estrógeno não comprometeram sua detecção nas lâminas preparadas nos diversos laboratórios. Tais variações associaram-se à diversidade de sistemas de recuperação antigênica e de amplificação, resultando ora em imunopositividade menos intensa, ora em maior fundo. Outros estudos devem abordar questões de interpretação, incluindo-se critérios para semiquantificação.

Papilomavírus humano (HPV) em lesões benignas e malignas de mucosa oral pelos métodos de imuno-histoquímica e hibridização in situ / Human papillomavirus (HPV)in benign and malignant oral lesions by immunohistochemistry and in situ hybridization methods

Quinze biópsias orais com diagnóstico histopatológico de papiloma (n=7), e carcinoma espinocelular invasivo (n=8) foram investigadas para a presença do papilomavírus humano (HPV) por imuno-histoquímica (IHQ) e hibridização in situ (HIS). As proteínas do capsídeo viral foram avaliadas por imuno-histoquímica com anticorpo policlonal e o DNA do vírus analisado por hibridização in situ com sondas biotiniladas de amplo espectro, 6/11 e 16/18. O HPV foi detectado por IHQ em 13 por cento (n=2) e, por HIS, em 60 por cento (n=9) das lesões orais. As duas biópsias positivas na IHQ também foram positivas para a presença do DNA de HPV 6/11. Além disso, o HPV 16/18 foi encontrado em 20 por cento dos carcinomas orais e em 7 por cento dos papilomas, enquanto o HPV 6/11 foi detectado em 7 por cento dos carcinomas e 26 por cento dos papilomas. Pode-se concluir deste estudo que a reação imuno-histoquímica é pouco sensível para o diagnóstico de HPV e que a presença do HPV 16/18 em lesões benignas e malignas sugere a participação deste vírus na carcinogênese oral.

Infecção crônica pelo vírus hepatite B-estudo imuno-histoquímico com ênfase na detecção dos antígenos HBe e HBx / Chronic infection by hepatitis B virus - an inmmunohistochemical study with emphasis in the emphasis in the detection of HBe and HBx antigens

O presente estudo visou a detecção de antígenos (AgHBe e AgHBx) do vírus da hepatite B (VHB) por método imuno-histoquímico Envision+peroxidase. Foi ainda pesquisada a distribuição e inter-relação entre estes antígenos, bem como com marcadores sorológicos de replicação viral (DNA-VHB, AgHBe), com AgHBc no tecido, e com os principais indicadores histológicos de estadiamento dos distúrbios da arquitetura hepática e o grau de atividade necro-inflamatória. A casuística compreendeu 196 amostras de fígado fixadas em formol e incluídas em parafina de pacientes com os varios estádios de hepatopatia crônica associada ao VHB. Os resultados mostraram positividade imuno-histoquímica para AgHBeem 63/196 (32,1 porcento) casos...

Alteraçöes coilocitóticas em esfregaços cérvico-vaginais: inter-relaçöes entre os aspectos citológico, imunocitoquímico para papilomavírus e morfométrico / Koilocytosis in cervicovaginal smears: morphological, immunocytochemical and morphometrical findings

Apresenta-se o estudo de 44 esfregaços cérvico-vaginais inflamatórios e neoplasias intra-epiteliais cervicais (NIC) com alteraçöes coilocitóticas (indicativas de infecçäo por papilomavírus). Estes esfregaços foram corados pelo método Papanicolaou e posteriormente pelo método de PAP (peroxidase-antiperoxidase) para antígeno de papilomavírus humano (Ag HPV). Efetuou-se a análise citométrica e estatística das dimençöes do citoplasma e núcleo e da relaçäo núcleo-citoplasmática (N/C) das células coilocitóticas, comparadas às das células de esfregaços normais. A relaçäo N/C nas células coilocitóticas foi significativamente maior que a das células normais em todas as faixas de diâmetro médio citoplasmático, tanto nos esfregaços Ag HPV positivos como nos negativos. Os casos Ag HPV negativos, que tiveram a relaçäo N/C igualmente aumentada, devem representar fases da infecçäo sem expressäo antigênica pelo método utilizado. Os resultados parecem apresentar mais um indício de que há uma estreita relaçäo infecçäo por papilomavírus e neoplasia, já que o aumento na relaçäo N/C constitui um dos principais critérios de malignidade

An immunohistochemic assay to localize leptospires in tissue specimens

Os autores apresentam uma técnica de imunoperoxidase para a identificaçäo de leptospiras em cortes de rim fixados em formol e emblocados em parafina. A variante metodológica inclui a utilizaçäo do complexo peroxidase-antiperoxidase, conferindo alta sensibilidade à reaçäo. Säo, ainda, discutidas algumas possíveis aplicaçöes do método ao estudo do acometimento renal na leptospirose

Detecçäo imuno-histoquímica de antígenos de surperfície ABH em carcinoma de células transicionais da bexiga / Immunohistochemical detection of ABH surface antigens in transitional cell carcinoma of the bladder

Perda dos antígenos de superfície ABH é relatada em diversas neoplasias malignas, incluindo-se os carcinomas de bexiga. Estudos empregando técnica de aderência de hemácias (SRCA) sugeram que esta perda é mais significativa nas neoplasias menos diferenciadas, com pior prognóstico. Entretanto, o impacto destes achados em termos práticos foi atenuado por limitaçöes metodológicas do SRCA. Sabendo da elevada eficácia dos métodos imuno-histoquímicos mais modernos, recorremos à lectina do Ulex europaeus para a detecçäo dos antígenos ABH, mediante amplificaçäo com o complexo avidina-biotina-peroxidase, pesquisando correlaçäo com a graduaçäo histológica, critério clássico na avaliaçäo prognóstica. Dos 66 estudados, 39 (59,1%) apresentavam manutençäo dos antígenos em suas membranas. Nos casos grau I a positividade atingiu 85,0%, sendo quantificada como "intensa" em 69,2%. Nos casos graus II a positividade foi 82,7%, mas só em 58,6% mostrou-se "intensa". No outro extremo, apenas 17,0% dos casos grau III mostraram positividade, que foi "intensa" em 12,5%. Concluímos, entäo, que este método imuno-histoquímico é de fácil execuçäo e aplicaçäo a amostras fixadas em formol e incluídas em parafina, podendo vir a ser útil na rotina urológica com vistas à avaliaçäo prognóstica